Aplicabilidad del citómetro de flujo para el estudio de la sensibilidad a los antibióticos e identificación por MALDI-TOF MS en muestras directas de orina

Abstract

[spa] Las infecciones del tracto urinario son muy frecuentes tanto a nivel nosocomial como comunitario. El aumento del uso de antibióticos cuando no son necesarios, está especialmente ligado al aumento de las resistencias a estos antimicrobianos. Debido a esto, la identificación microbiana y la determinación de la sensibilidad de los microorganismos a los antibióticos en los laboratorios de microbiología clínica, son tareas muy importantes en el manejo de los pacientes, especialmente, en aquellos que se encuentran en estados graves. El desarrollo de las nuevas tecnologías como la citometría de flujo o la espectrometría de masas por MALDITOF, han permitido realizar un screening para el diagnóstico microbiano y una identificación microbiana, respectivamente, en un período corto de tiempo, por eso, será importante valorar la utilidad del MALDI-TOF MS en la identificación del microorganismo causante de la infección en muestras directas de orina, además de estudiar la sensibilidad a los antibióticos en muestras directas comparando dos métodos: disco-placa (sensibilidad y especificidad ≥ 75 % en la mayoría de los casos) y el método habitual establecido por el laboratorio (VITEK2®). Para poder reducir la presión selectiva sobre los microorganismos, se valorará la utilidad de la citometría de flujo en el estudio de la sensibilidad de los antibióticos a partir de muestras directas de orina, dando resultados con 24 horas de antelación (resultados más significativos con recuentos ≥ 105 bacterias/mL en las muestras control en la mayoría de los casos).

[eng] Urinary tract infections are very common both at a nosocomial and a community level. The increased use of antibiotics when they are not needed is especially linked to a higher prevalence of resistance to these antimicrobials. Because of this, in clinical microbiology laboratories microbial identification and determination of the sensitivity of microorganisms to antibiotics are essential aims in patient’s management, mainly when critically ill patients are considered. The development of new technologies such as flow cytometry or mass spectrometry by MALDI-TOF, has allowed to perform fast screenings for microbial diagnosis and, also, fast microbial identifications. Therefore, it is important to assess the usefulness of MALDI-TOF MS to identify in urine samples the microorganism that causes the infection. Furthermore, it is also relevant to determine the sensitivity to the antibiotics in the urine samples comparing two methods: disk-plate (sensitivity and specificity ≥ 75% in most of cases) and the usual method established by VITEK2®. In order to reduce the selective pressure on microorganisms, the usefulness of flow cytometry will be assessed in the study of the sensitivity to the antibiotics using the urine samples, giving results up to 24 hours in advance (most significant results when control samples present ≥ 105 bacteria/mL).