Estudi de l'expressió de la proteïna PATJ en diferents cèl·lules del cervell en el context de l'Ictus isquèmic

Abstract

[cat] L’ictus isquèmic és la segona causa de mort a Espanya i la causa més freqüent de discapacitat mundial. Estudis mitjançant associació genètica han identificat la variant rs76221407 del gen PATJ (Pals1-associated tight junction), relacionada amb un mal pronòstic funcional de l’ictus. La proteïna PATJ té un paper molt important en l’establiment de les unions oclusives de les cèl·lules. El grup de Neurobiologia de la Universitat de les Illes Balears ha estudiat el paper de PATJ en cèl·lules endotelials cerebrals i ha demostrat que la disminució d’expressió de PATJ després de l’ictus activa processos com l’angiogènesi. Per tant PATJ es postula com un nou objectiu per a les estratègies de rehabilitació després d’un ictus. PATJ és una proteïna component del complex CRUMBS, que dirigeix la polaritat cel·lular. Pel fet que tant les neurones com les cèl·lules glials, astròcits, micròglia i oligodendòcits presenten polaritat, hipotetitzem que PATJ s’expressa en totes aquestes cèl·lules i que CRUMBS dirigeix dita polarització en les cèl·lules cerebrals. Per a dur a terme l’objectiu plantejat es va utilitzar teixit cerebral adult i de cries P7. En primer lloc, es va fer a terme una homogeneïtzació de teixit cerebral i una posterior separació dels distints tipus cel·lulars per FACS (Fluorescence Activating cell sorting). En segon lloc, a partir d’aquests, es va realitzar la retro transcripció per poder dur a terme l’estudi d’expressió de PATJ per RT-PCR. A partir d’aquests estudis s’ha pogut determinar una gran expressió de PATJ en els astròcits.

[spa] El ictus isquémico es la segunda causa de muerte en España y la causa más frecuente de discapacidad mundial. Estudios mediante asociación genética han identificado la variante rs76221407 del gen PATJ (Pals1-associated tight junction), relacionada con un mal pronóstico funcional del ictus. La proteína PATJ tiene un papel muy importante en el establecimiento de las uniones oclusivas de las células. El grupo de Neurobiología de la Universidad de las Islas Baleares ha estudiado el papel de PATJ en células endoteliales cerebrales y ha demostrado que la disminución de expresión de PATJ después del ictus activa procesos como la angiogénesis. Por lo tanto, PATJ se postula como un nuevo objetivo para las estrategias de rehabilitación después de un ictus. PATJ es una proteína componente del complejo CRUMBS, que dirige la polaridad celular. Debido a que tanto las neuronas como las células gliales, astrocitos, microglía y oligodendrocitos presentan polaridad, hipotetizamos que PATJ se expresa en todas estas células y que CRUMBS dirige dicha polaridad en las células cerebrales. Para llevar a cabo el objetivo planteado se utilizó tejido cerebral adulto y de crías P7. En primer lugar, se llevó a cabo una homogeneización de tejido cerebral y una posterior separación de los distintos tipos celulares por FACS (Fluorescence Activating cell sorting). En segundo lugar, a partir de estos, se realizó la retrotranscripción para poder llevar a cabo el estudio de expresión de PATJ por RT-PCR. A partir de estos estudios se ha podido determinar una gran expresión de PATJ en astrocitos. .

[eng] Ischemic stroke is the second leading cause of death in Spain and the most frequent cause of disability worldwide. Genetic association studies have identified the rs76221407 variant of the PATJ gene (Pals1-associated tight junction), which is associated with a poor functional prognosis of stroke. The PATJ protein has a very important role in the establishment of occlusive cell junctions. The Neurobiology group of the University of the Balearic Islands has studied the role of PATJ in brain endothelial cells and has shown that decreased expression of PATJ after stroke activates processes such as angiogenesis. Therefore, PATJ is postulated as a new target for rehabilitation strategies after stroke. PATJ is a component protein of the CRUMBS complex, which directs cell polarity. Because neurons, glial cells, astrocytes, microglia, and oligodendrocytes all exhibit polarity, we hypothesize that PATJ is expressed in all of these cells and the CRUMBS directs such polarization in brain cells. In order to carry out this objective, adult and P7 brain tissue was used. First, brain tissue homogenization and subsequent separation of the different cell types by FACS (Fluorescence Activating cell sorting) was carried out. Secondly, from these, retro transcription was performed to carry out the study of PATJ expression by RT-PCR. From these studies it was possible to determinate a high expression of PATJ in astrocytes.