Estudio piloto del mecanismo molecular del compuesto SM08502 para evaluar su posible uso como antitumoral en sarcomas de partes blandas

Abstract

[spa] Los sarcomas de partes blandas (SPB) constituyen un grupo heterogéneo de tumores de origen mesenquimal. Actualmente su tratamiento presenta altas tasas de recurrencia siendo necesario mejoras en las estrategias terapéuticas así como la identificación de dianas moleculares asociadas con la enfermedad. Recientes evidencias sobre la implicación de la vía WNT dependiente de β-catenina (WNT/β-catenina) en la génesis de los SPB, ha llevado al grupo de Terapias Avanzadas y Biomarcadores en Oncología Clínica del Instituto de Investigación Sanitaria Illes Balears (IdISBa) a incluir en sus líneas de investigación el estudio de inhibidores específicos de la vía WNT/β-catenina como posible terapia antitumoral en SPB. En un proyecto reciente, el grupo ha iniciado un estudio con el compuesto SM08502 que se ha postulado como un inhibidor de la vía WNT/β-catenina en cáncer colorrectal. Sin embargo, hasta el momento el mecanismo de acción publicado de este inhibidor no ha sido asociado con una diana concreta de la vía sino que se ha relacionado con la disrupción del mecanismo splicing alternativo. Con el objetivo de ahondar en el mecanismo molecular del inhibidor SM08502 para su posible uso terapéutico en SPB, en este trabajo se propuso en primer lugar un estudio bibliográfico para evaluar por un lado si su mecanismo de acción antitumoral está asociado a una inhibición selectiva de la vía WNT/β-catenina, y por otro para evaluar si el mecanismo splicing del ARNm está implicado en la sarcomagénesis para así identificar otras posibles dianas moleculares del SM08502 de interés terapéutico en SPB. En base a las dianas moleculares del inhibidor SM08502 extraídas del estudio bibliográfico, se diseñó un estudio experimental piloto para analizar el efecto del inhibidor en su expresión y modulación en líneas celulares tumorales, incluyendo SPB. Como resultado del estudio bibliográfico se comprobó que la disrupción del mecanismo splicing alternativo a través de la inhibición de la actividad de las quinasas CLK y las proteínas SRSF, constituye el principal mecanismo de acción antitumoral por el momento demostrado y publicado del compuesto SM08502. Aunque a través de este mecanismo se demostró la inhibición de la actividad de la vía WNT/β-catenina en diferentes neoplasias malignas, el efecto de SM08502 no parece ser específico de dicha vía, aunque de manera indirecta disminuye la expresión de genes importantes en la vía WNT/β-catenina como el componente DVL2 y los factores de transcripción TCF7 y TCF7L2. Además, se identificaron a los factores SRSF1 SRSF3 y SRSF6 como posibles dianas moleculares del SM08502 con interés terapéutico en SPB. De los cultivos primarios de diferentes tipos histológicos de SPB y de la línea celular SK-UT-1 de leiomiosarcoma estudiados, las células SK-UT-1 fueron las que presentaron una mayor sobreexpresión génica y proteica de las proteínas SRSF1, SRSF3 y SRSF6 en comparación con la de las células mesenquimales no tumorales. La menor expresión de los componentes de la vía WNT/β-catenina DVL2 y TCF7L2 (50 kDa) observada en el cultivo primario MCP021 de sarcoma indiferenciado con respecto a la línea SK-UT-1 de leiomiosarcoma sugiere una menor activación de esta vía en este cultivo primario. Tras el tratamiento de las células SPB estudiadas con el inhibidor SM08502 se observó una tendencia al aumento de los niveles celulares de las proteínas SRSF1 y SRSF3, y a la disminución de la expresión de las proteínas DVL2 y TCF7, independientemente del grado de activación de la vía WNT/β-catenina. En conjunto, los resultados de este trabajo han demostrado que la modulación de la expresión de ciertos factores SRSF y de algunos componentes de la vía WNT/ β-catenina, como DVL2 y TCF7, por SM08502 los convierten en interesantes dianas moleculares para el tratamiento de estos subtipos tumorales de SBP. Sin embargo, para determinar si el efecto de este compuesto es a través de la modulación del splicing alternativo de estos genes o si se produce a través de algún otro mecanismo molecular es necesario ampliar el estudio con más líneas y cultivos primarios de SBP.