Discovering key host factors in SARS-CoV-2 infection

Abstract

[spa] La pandèmia actual de la malaltia per COVID-19, causada per la infecció pel SARS-CoV-2, s’ha estès ràpidament en tot el món i ha provocat un impacte econòmic, social i de salut pública global. Per tant, és necessari comprendre la patogènesi de la infecció per SARS-CoV-2 per aportar nous coneixements pel disseny d’antivirals. En aquest context, Ugalde et al. (2022) varen realitzar un cribratge CRISPR knock-out a tot el genoma, del qual varen identificar proteïnes, no descrites fins al moment, com a determinants de la infecció per COVID-19. En aquest estudi es va determinar el paper de les proteïnes candidates PLAC8 i SPNS1 en la infecció per les diferents variants del virus. Es van realitzar Knock-out d’ambdues proteïnes per mitjà de l’eina CRISPR/Cas9 en la línia cel·lular de càncer de pàncrees MIA PaCa-2. A continuació, mitjançant un model d’infecció per pseudovirus que contenien l’Spike de les diferents variants d’interès del virus i reporter fluorescent, es realitzaren estudis funcionals d’infecció i de rescat que s’analitzaren mitjançant citometria de flux. Es va confirmar la disminució de PLAC8 i SPNS1 en els KO respecte el control, mitjançant Western Blot, RTqPCR i immunofluorescència. A més, es va confirmar que PLAC8 i SPNS1 són factors determinants per a la infecció de MIA PaCa-2, principalment per les variants de SARS-CoV-2 Wuhan-1 i Delta. Finalment, el rescat dels KO PLAC8 i SPNS1 mitjançant sobreexpressió d’un plasmidi resistent a Cas9 va recuperar la capacitat infectiva de les variants Wuhan-1 i Delta de SARS-CoV-2, confirmant el paper destacat de les proteïnes PLAC8 i SPNS1 en la infecció per COVID-19.